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转基因玉米BT11质粒分子标准物质
作者:王霞     来源: 中国计量科学研究院      点击次数:156      更新时间:2021-12-16 点击分享

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随着转基因作物在全世界范围内的广泛种植,其食用安全和环境安全问题一直受到广大消费者和各国政府及相关国际组织的高度重视。转基因质粒分子标准物质是转基因核酸量值的载体,可以为转基因植物核酸量值测量的准确性、可比性和有效性提供保障。因此中国计量科学研究院研制了转基因玉米BT11质粒分子标准物质。

转基因玉米BT11质粒分子标准物质含有一个93bp的转化体特异性基因片段和151bp的zSSIIb内标准基因片段。均匀性、稳定性是通过实时荧光定量PCR(qPCR)方法测得的Ct值,通过计算得到的转化体特异性基因和内标准基因拷贝数比值分析。质粒分子标准物质特性量值为质粒分子中含有的转化体特异性基因与内标准基因拷贝数比值。采用两种方法进行定值,一种方法是采用Sanger测序,测定pNIM-002质粒分子中转化体特异性基因与内标准基因片段拷贝数比值,测序结果表明两个基因片段均以单拷贝形式插入,测序比值为1.00,不确定度0.06;第二种方法是采用数字PCR(dPCR)法分别测定转化体特异性基因与内标准基因的拷贝数后再计算比值,PCR比值为0.98。经不确定度评价,pNIM-002标准物质PCR比值扩展不确定度为0.08。该标准物质500 μL/单元,将该标准物质稀释用于制作标准曲线时最小取样量为10 μL,用PCR方法直接测定时最小取样量为5μL。可作为测量标准用于转基因玉米BT11和相关食品的定性和定量检测,以及转基因玉米BT11 特异性检测方法的评价和实验室质量控制等领域。

GBW10091 转基因玉米BT11质粒分子标准物质

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