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系列EGFR基因突变游离DNA和质粒DNA标准物质
作者:高运华 王迪     来源: 中国计量科学研究院      点击次数:594      更新时间:2022-04-08 点击分享

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日前,中国计量科学研究院全新推出两种EGFR游离DNA标准物质,包括EGFR(T790M)突变型和对应野生型游离DNA标准物质。该组标准物质是酶切法获得的DNA片段,大小分布在144bp~176bp,与天然ctDNA高度一致,突变随机分布在DNA片段位置上,能够真实的反映和评估检测设备和检测方法的灵敏度。有效弥补了现有标准物质的不足,完全模拟自然条件下血液中存在的天然ctDNA生物学状态,均匀性好,高度稳定。该组标准物质特性量值为拷贝数浓度及突变丰度比,采用经过国际比对验证的数字PCR方法,多家联合定值的模式,确定了其特性量值,量值准确可靠。该标准物质可用做实时荧光定量PCR、数字PCR和高通量测序方法定量测定EGFR 基因拷贝数和突变丰度的测量标准,还可用于EGFR 基因突变方法验证和实验室质量控制等领域。

表1. EGFR(T790)基因野生型和突变型DNA标准物质特性量值和不确定度

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同时,中国计量科学研究院也全新推出了12种质粒DNA形态的EGFR基因突变标准物质,该系列标准物质以pUC18空白质粒为载体,分别将18-,19-,20-,21-外显子上30个突变、缺失位点整合到该系列质粒DNA标准物质中,同时提供对应的野生型质粒DNA标准物质。该系列标准物质的特性量值(质粒DNA质量浓度)由高分辨电感耦合等离子体质谱(HR-ICP-MS)、液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)和液相色谱-同位素稀释质谱(HPLC-IDMS)三种不同原理的准确、可靠测量程序进行确定,同时,如有需求,可提供经分子量换算得到的拷贝数浓度值。该系列标准物质的标准值可通过GBW06502国家一级标准物质的磷含量标准值溯源至SI基本单位:摩尔(mol),千克(kg)。该标准物质可用做实时荧光定量PCR、数字PCR和高通量测序方法定量测定EGFR 基因拷贝数和突变丰度的测量标准,还可用于EGFR 基因突变方法验证和实验室质量控制等领域。具体量值见表2。

表2. EGFR基因突变DNA标准物质特性量值和不确定度

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